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PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號 |
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粘附性大(dà)腸杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015320 |
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的試劑一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質控品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降，可能會導致出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保守(shǒu)性(xìng)。
粘附(fù)性大(dà)腸(cháng)杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑盒其中引物與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合(hé)的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基因(yīn)區，其特(tè)異(yì)性(xìng)程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一定要用同位素(sù)，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低
不(bù)需要(yào)分離病毒或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論。
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