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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
曼氏(shì)杆菌通用PCR檢測試劑盒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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曼氏杆(gān)菌通(tōng)用PCR檢測試劑盒PCR檢測(cè)試劑盒 |
Mannheimia spp.PCRPCR |
YS-P014402 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避(bì)光保存,避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸:低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨期:現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一般為1年(nián),這是指在適當的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35;
3. 以上要求(qiú)需在一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則(zé)該(gāi)次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯的指數(shù)擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑(yí)樣本;對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復(fù)核一次(cì),若復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期(qī),則判定為陽性(xìng),否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng);
3. 陰(yīn)性:無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙染,樣品(pǐn)交叉汙染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果;
2. 試劑(jì)運輸,保(bǎo)存(cún)不當或試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能下(xià)降,可(kě)能會(huì)導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性。
曼氏杆菌通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板的正確結合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大大增加,被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基(jī)因區(qū),其特異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量(liáng)是以指數(shù)方式(shì)增加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞;在病毒(dú)的檢測(cè)中,PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位);在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出(chū)率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後,即在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一(yī)般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī),不一定要(yào)用同位素(sù),無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求低
不需要分離(lí)病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛發,細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技術概論。
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