產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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異源(yuán)曼(màn)氏杆菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Mannheimia varigenaPCR |
YS-P014403 |
分類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分(fēn)的(dí)試劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增曲綫的最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實驗中同時滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則(zé)判定為陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
異源曼氏(shì)杆菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中引物與模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及(jí)引物鏈的延(yán)伸是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較高的溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合的特(tè)異性大大增加，被擴增的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū)，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小檢出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反應液加好後(hòu)，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行(háng)變性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同位素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要求(qiú)低
不需要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴增(zēng)模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論。
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