產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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悉尼(ní)馬爾太蟲PCR檢測(cè)試劑盒 |
Marteilia sydneyiPCR |
YS-P014408 |
分類:PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū):低溫,避(bì)光。
有效期(qī):一年
貨(huò)期:現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般(bān)為1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢測結(jié)果(guǒ)應為陽(yáng)性,有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期,Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次(cì)實驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否(fǒu)則該(gāi)次實驗(yàn)視為無效。
2.可疑:有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本;對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次(cì),若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判定為(wéi)陽性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰性:無指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn),試劑(jì)汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸(shū),保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準確引起的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降(jiàng),可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
②鹼基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
悉(xī)尼馬爾(ěr)太(tài)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物的結合(hé)(復性(xìng))可以在較高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng),結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加(jiā),被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因片(piàn)段(duàn)也就能保持很高的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特異性(xìng)和(hé)保守性高的(dí)靶基(jī)因區(qū),其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數(shù)方式增(zēng)加的,能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸(shēn)反應(yīng),一般(bān)在2~4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析,不(bù)一定(dìng)要用同位素(sù),無放射性(xìng)汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要求低(dī)
不需要分(fēn)離病(bìng)毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用(yòng)臨床標本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發,細胞,活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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