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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
曼那(nà)角(jiǎo)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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曼(màn)那角(jiǎo)病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Menangle virusRTPCR |
YS-P014413 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一(yī)般為1年，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的試劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣本建議復核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異(yì)性與保守(shǒu)性。
曼那(nà)角(jiǎo)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引物與模板的正確結合是關鍵。引(yǐn)物與模板的結合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反應中模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異(yì)性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很高的正確(què)度(dù)。再通過選擇(zé)特異性和保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病(bìng)毒的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電泳分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
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