產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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石膏樣小孢(bāo)子菌PCR檢測(cè)試劑(jì)盒 |
Microsporum gypseumPCR |
YS-P014417 |
分類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的有效(xiào)期一(yī)般為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫的最高點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能(néng)會(huì)導致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異(yì)性與保守性。
石膏樣(yàng)小(xiǎo)孢子菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的正確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進行，結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增(zēng)加，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選擇特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶基因區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式增(zēng)加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時完(wán)成擴增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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