產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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多態小小菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Mima polymorphaPCR |
YS-P014424 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為1年，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的試劑(jì)一般(bān)要(yào)貯存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判定為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確引起的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會(huì)導(dǎo)致出現假陰性結果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼基配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
多態小小菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物(wù)與模板的正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的結合及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中(zhōng)模板與引物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大大(dà)增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因(yīn)區，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位(wèi))；在細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增液和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分析，不一(yī)定要用同(tóng)位素(sù)，無放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求低
不需要分離(lí)病毒(dú)或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增模(mó)板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術(shù)概論。
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