產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 規格 | 貨(huò)號(hào) |
|
人(rén)GAPDH基因PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015195 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性，有明顯的(dí)指數擴增期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建議復核一次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或試劑配製不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會導致出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性。
人GAPDH基因PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引物與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反應中模板與引物的結合(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行，結合的特異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也就能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細胞；在病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位素，無放射性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標本如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
