產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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改良(liáng)安卡(qiǎ)拉痘(dòu)苗病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)PCR |
YS-P014427 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是(shì)指在適當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測部分(fēn)試劑(jì)則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否則該次(cì)實驗視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當或(huò)試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降，可能會導致出(chū)現假陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性。
改良安(ān)卡拉痘(dòu)苗病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特(tè)異性大大增加，被擴增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退火-延(yán)伸反應，一般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產物(wù)一般用電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均可作為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床標本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論。
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