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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬性
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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小鼠白血(xiě)病(bìng)病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
Mouse Leukemia Virus(MLV)RTPCR |
YS-P014437 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒的有效期一般為1年，這是指在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴增部分的試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定為陰性樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引起的試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可能(néng)會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的特異(yì)性與保(bǎo)守(shǒu)性。
小鼠白(bái)血病病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正確結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模板的結(jié)合及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合成反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在較高的溫度下進(jìn)行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再通過(guò)選擇特異(yì)性和保守性(xìng)高的(dí)靶基因區(qū)，其特(tè)異(yì)性程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴(kuò)增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一(yī)定要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離病毒或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴增模板。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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