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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號 |
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小(xiǎo)鼠肝(gān)炎病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Mouse Hepatitis Virus(MHV)RTPCR |
YS-P014436 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為1年，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢測部分試(shì)劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛好超過正(zhèng)常陰性質控品擴增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗視為(wéi)無效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會(huì)導致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
小鼠肝炎病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模板的正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性(xìng))可以在較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合的特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因區，其特異性程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細(xì)胞；在病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴增反應。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要用同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要分離病毒或細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板。可直接用臨床標本如血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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