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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號 |
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墨累穀(gǔ)腦(nǎo)炎(yán)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Murray Valley Encephalitis Virus(MVEV)RTPCR |
YS-P014442 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這是指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽性，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該次實(shí)驗視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建(jiàn)議復核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則(zé)判定為陽性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存不當(dāng)或(huò)試劑配製不(bù)準確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
墨(mò)累穀腦炎(yán)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物與模板的正(zhèng)確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合(hé)及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成量是(shì)以指數方(fāng)式(shì)增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī)，不一(yī)定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純度要(yào)求低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
