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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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牛(niú)分(fēn)支(zhī)杆(gān)菌卡介苗PCR檢測試劑盒(hé) |
Mycobacterium bovis BCGPCR |
YS-P014450 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存,避免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運輸(shū):低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般為1年,這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑一般要貯存於-20℃下,產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高點。
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性,有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足,否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為無效。
2.可疑:有明顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本;對(duì)於可疑樣本(běn)建議復核(hé)一次,若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期,則判(pàn)定為陽性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn),試劑汙(wū)染(rǎn),樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸(shū),保存不(bù)當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng),可(kě)能(néng)會導致出(chū)現假陰性(xìng)結果。
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實性;
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
牛分支杆菌卡(qiǎ)介苗(miáo)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的正確結(jié)合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行,結(jié)合(hé)的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加,被擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶基(jī)因區,其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中,PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位(wèi));在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次性地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu),即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng),一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一(yī)定要用同位(wèi)素,無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染,易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求低
不需要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌及培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液(yè),體腔液,洗嗽液,毛發,細胞,活PCR技(jì)術概(gài)論。
