產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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牛(niú)分枝杆菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Mycobacterium bovisPCR |
YS-P014451 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的最高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品的(dí)檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準確引起的(dí)試(shì)劑檢測效能(néng)下降，可能(néng)會導致出現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守性。
牛分枝(zhī)杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的溫度下進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性高的靶基因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞；在病毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無放射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離病毒或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床標本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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