產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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副結核(hé)分(fēn)支杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Mycobacterium paratuberculosisPCR |
YS-P014461 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保存(cún),避免反復(fù)凍融。
運輸(shū):低溫(wēn),避光(guāng)。
有效期(qī):一年(nián)
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年(nián),這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢測結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期,Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實驗中同(tóng)時滿足,否(fǒu)則該次實(shí)驗視為無(wú)效。
2.可疑:有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復核(hé)一(yī)次(cì),若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),則判(pàn)定為(wéi)陽性,否則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性;
3. 陰性(xìng):無指數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試(shì)劑汙染,樣品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結果;
2. 試劑運輸,保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢測效(xiào)能下(xià)降(jiàng),可能會(huì)導致出現假陰(yīn)性結果。
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性;
④靶基因的特(tè)異性與(yǔ)保守性(xìng)。
副結(jié)核(hé)分支杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng),使反應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行,結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā),被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段也就能保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因區,其(qí)特(tè)異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加的(dí),能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞;在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶,一次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液加好後(hòu),即在(zài)DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火-延(yán)伸反應,一般(bān)在(zài)2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不(bù)一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素,無放射性汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製品及總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可直接用臨床標本(běn)如血液,體腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞,活PCR技(jì)術(shù)概論(lùn)。
- 上一(yī)條(tiáo):海豹(bào)分(fēn)支(zhī)杆菌PCR檢測試劑(jì)盒
- 下(xià)一條(tiáo):田(tián)鼠分(fēn)枝杆菌(jūn)PCR檢測試劑(jì)盒
