產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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支(zhī)原(yuán)體(tǐ)通(tōng)用(yòng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Mycoplasma spp.PCR |
YS-P014490 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫設定在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴增曲綫的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一次(cì)，若復(fù)核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能會導(dǎo)致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
支(zhī)原(yuán)體(tǐ)通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引物與模板的正(zhèng)確(què)結合是關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性，使反應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的溫(wēn)度下進(jìn)行，結(jié)合的特(tè)異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增的靶基因片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單位)；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一定要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低(dī)
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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