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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
|
分(fēn)枝杆菌(jūn)屬通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Mycobacterium spp.PCR |
YS-P014465 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一般為(wéi)1年，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試劑一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴(kuò)增曲綫的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議復(fù)核一次，若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙(wū)染會出(chū)現(xiàn)假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保守性(xìng)。
分枝(zhī)杆(gān)菌(jūn)屬通用(yòng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的正確結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的結(jié)合(復性)可以在較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被擴增(zēng)的靶基因(yīn)片段也(yě)就能保持很(hěn)高的(dí)正確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產物一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求低(dī)
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
