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產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
|
貓支原(yuán)體(tǐ)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Mycoplasma felisPCR |
YS-P014475 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試(shì)劑盒的有效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測部分試劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值綫設(shè)定在剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結(jié)果應為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會(huì)出現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
貓支原(yuán)體(tǐ)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的正確結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特異性大大增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保持很高(gāo)的正(zhèng)確度。再(zài)通(tōng)過選擇特異(yì)性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始待測模板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個細胞中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位素，無放射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不(bù)需要分離(lí)病毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增模板。可(kě)直接用臨床標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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