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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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犬(quǎn)血支原(yuán)體PCR檢測試劑(jì)盒(hé) |
Mycoplasma haemocanisPCR |
YS-P014479 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保存，避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一般(bān)為1年，這是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析(xī)條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應(yīng)小於等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑配製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能會導致出(chū)現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
犬(quǎn)血支(zhī)原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下進行，結合的特異性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守(shǒu)性高的靶基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數(shù)方式增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸反應，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
