產(chǎn)品中心
PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名稱 | 貨號 |
|
腦膜炎(yán)奈瑟(sè)菌(jūn)PCR檢測試劑盒(hé) |
Neisseria meningitidisPCR |
YS-P014500 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避(bì)光(guāng)保存,避免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年(nián)
貨(huò)期:現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般為1年,這是指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸擴增部分的(dí)試劑一般(bān)要貯存於-20℃下(xià),產物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設定:將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫的最高點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應為陽(yáng)性,有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為無(wú)效。
2.可疑:有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本(běn);對於(yú)可疑樣本建(jiàn)議復核一次(cì),若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,則(zé)判定為陽性(xìng),否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性:無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙染,樣(yàng)品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果;
2. 試(shì)劑(jì)運輸,保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
②鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性(xìng);
④靶基因的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
腦膜(mó)炎奈瑟菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒其中引(yǐn)物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板(bǎn)的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下進行,結(jié)合的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加(jiā),被(bèi)擴增(zēng)的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很(hěn)高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區,其特異(yì)性程度(dù)就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數方式(shì)增加的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位);在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反應用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一(yī)次(cì)性地將反應(yīng)液加(jiā)好後,即(jí)在(zài)DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定(dìng)要用同位素,無(wú)放射性(xìng)汙染,易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及培(péi)養細胞,DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模板。可直(zhí)接(jiē)用臨床標(biāo)本(běn)如(rú)血液,體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發(fā),細胞,活(huó)PCR技術概論。
