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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
畸形(xíng)細(xì)頸綫蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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畸形細(xì)頸綫(xiàn)蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Nematodirus abnormalisPCR |
YS-P014502 |
分類:PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件:-20℃避光(guāng)保存,避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸:低(dī)溫,避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般為1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下,產物檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴增期(qī),Ct值(zhí)應小於等於35;
3. 以上要(yào)求需在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú),否則該次實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑樣(yàng)本(běn);對(duì)於可疑樣本建議復核一次,若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期,則判定(dìng)為陽性,否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境(jìng)汙染,試(shì)劑汙染(rǎn),樣品交叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保存不(bù)當(dāng)或(huò)試劑配製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降,可能會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性;
④靶基因的(dí)特(tè)異性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
畸(jī)形(xíng)細頸(jǐng)綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵。引物(wù)與模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合酶合(hé)成反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性,使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進行,結合的特異(yì)性(xìng)大大(dà)增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區,其特(tè)異(yì)性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí),能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細(xì)胞(bāo);在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成單位);在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi),一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu),即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應,一(yī)般在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成擴增反應。擴增產物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定要(yào)用(yòng)同位素,無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染(rǎn),易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血液,體腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液,毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技(jì)術(shù)概論。
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