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產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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嗜熱(rè)鏈球(qiú)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Streptococcus thermophilusPCR |
YS-P014795 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
【結(jié)果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定在剛好超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯的指數擴增期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一(yī)次實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效(xiào)。
【結果判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑(yí)樣本；對(duì)於可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判定為陽性，否則(zé)判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不(bù)當或試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出現假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠實性；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
嗜(shì)熱鏈(liàn)球(qiú)菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結合是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板與引物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū)，其特(tè)異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式增加(jiā)的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的起始待測(cè)模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度要(yào)求低
不(bù)需要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
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