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PCR檢測試(shì)劑盒
匙(chí)狀(zhuàng)細(xì)頸毛樣綫(xiàn)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨號 |
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匙狀細(xì)頸(jǐng)毛(máo)樣綫蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Nematodirus spathigerPCR |
YS-P014506 |
分(fēn)類:PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光保存,避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效期:一年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián),這(zhè)是(shì)指在(zài)適當的儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾值(zhí)綫設定在(zài)剛好超過(guò)正常陰性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性(xìng),有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期,Ct值(zhí)應小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無效。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn);對於可疑(yí)樣本建議復核一次,若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指數擴增期,則判定為陽(yáng)性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰性:無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染(rǎn),試劑汙染(rǎn),樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保存不當或試劑配(pèi)製不準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降,可能會(huì)導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基配對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性;
④靶(bǎ)基因(yīn)的特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
匙狀細(xì)頸(jǐng)毛(máo)樣(yàng)綫蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進行(háng),結合的(dí)特異性(xìng)大大增加(jiā),被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片(piàn)段也就能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過選擇特異性(xìng)和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區(qū),其特(tè)異性程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的,能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模(mó)板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo);在(zài)病(bìng)毒的檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單位(wèi));在細(xì)菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便,快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合酶,一次性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後,即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸反應,一(yī)般在2~4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī),不一定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素,無放射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè),體腔(qiāng)液,洗嗽(sòu)液(yè),毛發(fā),細(xì)胞,活PCR技術(shù)概論。
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