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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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諾如病毒(dú)通用(yòng)PCR檢測試劑盒 |
Norwalk Viruses(NV)RTPCR |
YS-P014522 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復凍融。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實(shí)驗視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則(zé)判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑配製(zhì)不準確引起的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與保守性。
諾如病毒(dú)通(tōng)用(yòng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使反應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的(dí)正確(què)度。再通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶基因區(qū)，其特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細(xì)菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度要求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術概論。
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