產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
|
阿(ā)尼昂尼(ní)昂(áng)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
O'nyongnyong Virus(ONNV)RTPCR |
YS-P014532 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在適當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的(dí)最高點。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的(dí)檢(jiǎn)測結(jié)果應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在(zài)一(yī)次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建議復(fù)核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配製不準確引起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性(xìng)。
阿尼昂尼昂病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模(mó)板的正(zhèng)確結合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以在(zài)較高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過選擇特(tè)異性和保守(shǒu)性高的靶基因區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論。
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