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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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同病毒綿羊(yáng)膿皰病(bìng)毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
Ovine Ecthyma Virus（Orf）PCR |
YS-P014547 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是指在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性，有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數擴增期，則判定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會出(chū)現假陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能會導致(zhì)出現假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特(tè)異性(xìng)與保守性。
同(tóng)病毒(dú)綿羊膿(nóng)皰(pào)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結(jié)合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合的特異性大大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高的正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是以指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學中zui小檢出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一定要(yào)用同位素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要分離(lí)病毒或細菌(jūn)及培(péi)養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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