產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬性
| 產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
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綿(mián)羊(yáng)皰疹病(bìng)毒型PCR檢測(cè)試劑盒 |
Ovine Herpesvirus 1（OHV2)1PCR |
YS-P014548 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效期：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍融。
【結果分析條件設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗中同時滿足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對(duì)於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判(pàn)定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染，試劑汙染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不當或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準確引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
綿羊(yáng)皰(pào)疹病毒(dú)型(xíng)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的正確(què)結(jié)合是關鍵。引物與模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性，使反應中模板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行，結(jié)合(hé)的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就能保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區(qū)，其特異性程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般用(yòng)電泳分析，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射(shè)性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求低
不需要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增(zēng)模板。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
