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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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多殺(shā)巴斯德菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Pasteurella multocidaPCR |
YS-P014563 |
分類：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的儲存溫度下(xià)。核(hé)酸擴增部分的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在一(yī)次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製(zhì)不準確(què)引起的試劑檢測效能下降，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
多殺巴斯德菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是(shì)關鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可(kě)以在較高的溫度(dù)下進行，結合的特異性大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能保持很(hěn)高(gāo)的正確度。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守性(xìng)高的靶基(jī)因區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴增液和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般用電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定要用同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純度要求低
不需(xū)要分離病毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為擴增模板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論(lùn)。
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