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PCR檢測試劑盒(hé)
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號 |
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侵肺(fèi)巴(bā)斯德(dé)菌PCR檢測試劑(jì)盒 |
Pasteurella pneunotropicaPCR |
YS-P014564 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析(xī)條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求需在一次實驗中同時滿足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果判斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本建議復核一次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下(xià)降，可能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
侵(qīn)肺(fèi)巴(bā)斯(sī)德(dé)菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板的正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下進行，結合的特異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性和保(bǎo)守性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應，一般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素(sù)，無放射性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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