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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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展(zhǎn)開(kāi)青黴(méi)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Penicillium patulumPCR |
YS-P014576 |
分類:PCR檢測試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保存(cún),避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸:低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一年(nián)
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年,這是(shì)指在適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢測部(bù)分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定:將閾(yù)值綫(xiàn)設定在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品擴增曲綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值(zhí)應小於(yú)等於35;
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足,否則該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn);對(duì)於(yú)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一(yī)次(cì),若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴增期,則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng),否則(zé)判(pàn)定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無(wú)指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染,試劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性結(jié)果(guǒ);
2. 試劑運輸(shū),保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降,可能會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
②鹼基配對(duì)原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基(jī)因(yīn)的(dí)特異性與保守(shǒu)性。
展(zhǎn)開青(qīng)黴PCR檢測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性及(jí)Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高的(dí)溫度下進行,結合的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加,被擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片段也就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基因區(qū),其特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生(shēng)成量是以指數方式增(zēng)加的,能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo);在病毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈(líng)敏度可達3個RFU(空斑形成單(dān)位);在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後(hòu),即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反應(yīng),一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析,不(bù)一定要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù),無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如(rú)血液,體腔液,洗嗽液,毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概論。
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