產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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三日(rì)瘧原蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Plasmodium malariaePCR |
YS-P014597 |
分(fēn)類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存條件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存,避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有效期:一(yī)年
貨(huò)期(qī):現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯存於-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結果應為(wéi)陽(yáng)性,有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於(yú)35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
2.可(kě)疑(yí):有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),且38≤Ct<40,此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於可(kě)疑樣本建議復(fù)核一次,若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期,則(zé)判(pàn)定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴(kuò)增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出(chū)現假(jiǎ)陽性結(jié)果;
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸,保存(cún)不(bù)當或試劑配(pèi)製不準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下降,可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保守(shǒu)性。
三(sān)日瘧原(yuán)蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進(jìn)行(háng),結合的特(tè)異性大(dà)大(dà)增加,被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量是以指數方式(shì)增(zēng)加的,能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待測模板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個細胞(bāo)中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞;在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn),快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好後,即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應,一般在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析,不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素(sù),無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度(dù)要求(qiú)低
不(bù)需(xū)要分離病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製(zhì)品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液,體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞(bāo),活PCR技術概(gài)論(lùn)。
