產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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諾氏瘧原(yuán)蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒 |
Plasmodium knowlesiPCR |
YS-P014596 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保(bǎo)存，避免反復凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為1年，這(zhè)是指在適(shì)當的(dí)儲存溫度下。核酸(suān)擴增部分的試(shì)劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分(fēn)試(shì)劑則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需在(zài)一次實(shí)驗中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於可(kě)疑樣本(běn)建議復(fù)核一次(cì)，若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定為陰性；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配製不準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的忠實性(xìng)；
④靶基(jī)因的特異性與(yǔ)保守性。
諾氏瘧(nüè)原(yuán)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物(wù)與模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結合(復性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度下進行，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異性程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產物(wù)的生成量是以指數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不(bù)一定要(yào)用同位素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低(dī)
不(bù)需要分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增模板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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