產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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豬血凝(níng)性腦脊髓(suǐ)炎病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒 |
Porcine Hemagglultinating Encephalomyelitis Virus（PHEV）RTPCR |
YS-P014613 |
分類：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正常(cháng)陰性質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為陰(yīn)性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能會(huì)導致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異性與保(bǎo)守性。
豬(zhū)血凝(níng)性腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確(què)結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延伸是遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使反應中模板(bǎn)與引物(wù)的結(jié)合(復性)可以在較高的溫(wēn)度下進行，結合的特異性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確(què)度(dù)。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為3個細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增反應。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同(tóng)位(wèi)素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒或細菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本如血(xiě)液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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