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PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
雷(léi)氏普羅威登(dēng)斯(sī)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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雷氏普(pǔ)羅(luó)威登斯菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Providencia rettgeriPCR |
YS-P014645 |
分類(lèi):PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸:低(dī)溫,避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期:一年
貨(huò)期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效期(qī)一般為1年,這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴增部(bù)分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢測部分試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定:將閾值綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
2. 陽性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應為陽性(xìng),有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期,Ct值應小於等(děng)於35;
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期,且38≤Ct<40,此時樣本為可(kě)疑樣本(běn);對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一次,若(ruò)復(fù)核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴增(zēng)期,則判定為(wéi)陽(yáng)性,否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數擴增期(qī),Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染,試劑(jì)汙染,樣品交叉汙染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引起的試劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導致出(chū)現假陰(yīn)性結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng);
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性。
雷(léi)氏普羅威(wēi)登斯菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模(mó)板與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng),結(jié)合(hé)的特(tè)異性大大(dà)增加,被擴增的靶基因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持很高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū),其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以指數方(fāng)式(shì)增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個(gè)靶細胞;在(zài)病毒(dú)的檢測中,PCR的(dí)靈(líng)敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶,一(yī)次性(xìng)地將反應液加好(hǎo)後,即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋上(shàng)進行(háng)變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物(wù)一般用電泳分(fēn)析(xī),不(bù)一定(dìng)要用同位素(sù),無(wú)放射性(xìng)汙染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標(biāo)本如血液,體腔液,洗嗽(sòu)液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞,活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
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