產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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偽牛(niú)痘(dòu)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Pseudocowpox Virus(PCPV)PCR |
YS-P014648 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低(dī)溫,避光(guāng)。
有效(xiào)期(qī):一年
貨期(qī):現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為1年,這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部分(fēn)的試劑一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾值(zhí)綫設(shè)定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽性,有明(míng)顯的指數(shù)擴增(zēng)期,Ct值應(yīng)小於(yú)等於(yú)35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可疑:有明顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣本;對(duì)於(yú)可疑樣(yàng)本建(jiàn)議復(fù)核一次(cì),若(ruò)復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增期,則判定(dìng)為陽性,否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性;
3. 陰性:無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū),保存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng),可能會導(dǎo)致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基因的特異性(xìng)與保守性(xìng)。
偽(wěi)牛(niú)痘病(bìng)毒PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物與模板的正(zhèng)確(què)結合是關(guān)鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)結合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合(hé)成反應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng),使反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以在(zài)較高的溫度(dù)下進行,結合的特異性(xìng)大大增加(jiā),被(bèi)擴增(zēng)的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保持很高的正(zhèng)確度。再(zài)通過(guò)選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性高的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增加的(dí),能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細胞;在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位);在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶,一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後,即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋上進(jìn)行變性(xìng)-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電泳分析(xī),不一(yī)定要(yào)用同位素(sù),無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn),易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純(chún)度要求低
不需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細胞,DNA 粗製品及總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用臨床標本(běn)如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽液(yè),毛發,細胞(bāo),活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
- 上一條(tiáo):綠膿(nóng)假單(dān)胞菌PCR檢測試劑盒
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