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PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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斯氏普(pǔ)羅(luó)威登(dēng)斯菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Providencia stuartiPCR |
YS-P014647 |
分類:PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光(guāng)。
有效(xiào)期:一(yī)年(nián)
貨期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年,這是指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復凍融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽性(xìng),有明顯的指(zhǐ)數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35;
3. 以(yǐ)上要求需在一(yī)次實驗中同時(shí)滿足,否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此時(shí)樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn);對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核(hé)一(yī)次,若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,則判定為陽(yáng)性,否則(zé)判(pàn)定為陰性;
3. 陰性:無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果;
2. 試劑運輸,保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引起的(dí)試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能會導致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結果(guǒ)。
②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性;
④靶基因的(dí)特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
斯氏(shì)普(pǔ)羅(luó)威登(dēng)斯菌PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng),結合的(dí)特異性大大增加,被擴(kuò)增的(dí)靶基因片段(duàn)也就(jiù)能保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的靶(bǎ)基(jī)因區(qū),其特(tè)異性程度(dù)就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的,能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴(kuò)增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo);在病毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位);在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反(fǎn)應,一般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產物一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī),不一定(dìng)要用(yòng)同位素(sù),無放(fàng)射性汙(wū)染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的純(chún)度要求低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接(jiē)用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽(sòu)液,毛發,細胞,活PCR技術概(gài)論。
- 上一條(tiáo):偽(wěi)牛(niú)痘病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
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