產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
| 產品名(míng)稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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熒(yíng)光假單胞菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Pseudomonas fluorescensPCR |
YS-P014650 |
分類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存條件:-20℃避(bì)光保存,避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸:低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī):一(yī)年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一般為(wéi)1年,這是(shì)指在適當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一(yī)般要(yào)貯存於(yú)-20℃下,產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設定:將(jiāng)閾值綫設定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測結(jié)果應為陽性,有(yǒu)明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期(qī),Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於35;
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實驗中(zhōng)同時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑:有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可(kě)疑樣本(běn);對於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核(hé)一次,若復核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性;
3. 陰性:無指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染,試(shì)劑汙(wū)染,樣(yàng)品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果;
2. 試(shì)劑運輸,保存不(bù)當或試劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng),可能(néng)會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果。
②鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé);
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng);
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
熒(yíng)光假單(dān)胞菌(jūn)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引物鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高溫性,使反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結合(復性)可(kě)以在較高的(dí)溫度(dù)下(xià)進行,結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能保持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再通過(guò)選擇特異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區,其特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數方(fāng)式增(zēng)加的,能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個細胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞;在病毒的(dí)檢測中(zhōng),PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi));在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶,一(yī)次性地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般用電泳(yǒng)分析,不一定(dìng)要(yào)用(yòng)同位(wèi)素,無放射性汙染(rǎn),易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度(dù)要求低(dī)
不需要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞,DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液,體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛(máo)發,細胞,活(huó)PCR技術概(gài)論。
- 上一(yī)條:惡臭(chòu)假(jiǎ)單胞(bāo)菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
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