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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒
商品屬性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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兔(tù)粘液瘤(liú)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Rabbit Myxomatosis Virus(RMV)PCR |
YS-P014658 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融。
【結果分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的檢測結果應為陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在(zài)一(yī)次實驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實驗視為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次，若(ruò)復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且有指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效能下(xià)降，可(kě)能會(huì)導致出(chū)現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與保守性。
兔(tù)粘(nián)液瘤(liú)病(bìng)毒(dú)PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合及(jí)引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復性)可以在(zài)較高的溫度(dù)下(xià)進行(háng)，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇特(tè)異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以指數(shù)方式增加的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個(gè)靶細胞；在病毒(dú)的(dí)檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形成單(dān)位(wèi))；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反應液加好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不一定要(yào)用同位素，無放射(shè)性(xìng)汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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