產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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浣(huàn)熊痘(dòu)病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Raccoonpox virusPCR |
YS-P014663 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期(qī)，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則(zé)判定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試劑(jì)配製不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可能會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的(dí)特(tè)異(yì)性與保守性。
浣熊痘病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引物與模板(bǎn)的正確結合(hé)是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合(hé)及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合的特異性(xìng)大大增(zēng)加，被擴增的靶基因片(piàn)段也就能保持很(hěn)高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選擇(zé)特異性和保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成量是以指數方式增加(jiā)的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液和水浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離病毒或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論。
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