產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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蛙病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
RanavirusPCR |
YS-P014668 |
分(fēn)類:PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保(bǎo)存,避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸(shū):低溫(wēn),避光。
有(yǒu)效期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般為(wéi)1年,這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度下。核酸擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯存(cún)於-20℃下,產物檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好超過正常(cháng)陰性(xìng)質控品(pǐn)擴增曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增(zēng)期,Ct值(zhí)應(yīng)小於等於35;
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一(yī)次實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
2.可疑(yí):有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於可疑樣本建(jiàn)議復核(hé)一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增(zēng)期,則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng),否(fǒu)則判定為陰性;
3. 陰性:無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值均判定為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙(wū)染,試劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試劑運輸,保存不當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效能下降(jiàng),可(kě)能(néng)會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
②鹼基配(pèi)對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的(dí)特異性與(yǔ)保守性。
蛙病毒PCR檢測試劑盒其中引(yǐn)物與模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基(jī)配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性,使(shǐ)反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可(kě)以在較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行,結合(hé)的(dí)特異性大(dà)大增加(jiā),被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區,其特異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式增加(jiā)的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個細胞中檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo);在病(bìng)毒(dú)的檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位);在(zài)細菌(jūn)學中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高(gāo)溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶,一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好後,即在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應,一(yī)般(bān)在2~4 小時完(wán)成擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析,不(bù)一(yī)定要用同位素(sù),無(wú)放射(shè)性(xìng)汙染,易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度要(yào)求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分(fēn)離病毒或細(xì)菌(jūn)及培養細胞,DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液(yè),體腔液,洗(xǐ)嗽液,毛發,細胞,活PCR技術概論。
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