產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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科(kē)恩(ēn)酒(jiǔ)曲(qū)菌PCR檢測試劑盒(hé) |
Rhizopus cohniiPCR |
YS-P014679 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的有(yǒu)效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增部(bù)分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增曲綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性質控品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存(cún)不當或試(shì)劑配製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降，可能(néng)會導致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合(hé)成反應的忠實性；
④靶基因(yīn)的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
科(kē)恩(ēn)酒(jiǔ)曲菌PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其中引物與模(mó)板的正(zhèng)確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及(jí)引物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基配(pèi)對原則的。聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板與引物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以在較高的溫度下(xià)進行，結(jié)合(hé)的(dí)特(tè)異(yì)性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被擴增(zēng)的(dí)靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測(cè)模(mó)板擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次性地將反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增產(chǎn)物一般用電(diàn)泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求低(dī)
不需要分離(lí)病毒或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如(rú)血液(yè)，體腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術(shù)概(gài)論(lùn)。
