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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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白(bái)惡(è)立(lì)克(kè)次(cì)氏體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé) |
Rickettsia gravesiiPCR |
YS-P014682 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有效期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下(xià)。核酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分析條件設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超過正常陰(yīn)性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實驗視為無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染，試劑汙(wū)染，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測效能下(xià)降，可能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性與保守性(xìng)。
白(bái)惡立克(kè)次氏體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確(què)結(jié)合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板(bǎn)的結合(hé)及引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板(bǎn)與引物的結合(復性(xìng))可(kě)以在較高(gāo)的溫度下進行，結(jié)合的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就能保持很(hěn)高(gāo)的正確(què)度。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程(chéng)度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢出率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進行變(biàn)性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增產物一般用電泳分析(xī)，不一定要用(yòng)同位素，無(wú)放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低
不需要分離病(bìng)毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴增(zēng)模(mó)板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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