產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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鴨疫裏(lǐ)默氏杆菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
Riemerella anatipestiferPCR |
YS-P014688 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存(cún)溫度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分(fēn)的(dí)試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融。
【結果分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議復核一次，若(ruò)復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑汙染，樣品交叉汙(wū)染會(huì)出(chū)現假陽性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸，保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的試劑檢測效能(néng)下降，可能會(huì)導致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異(yì)性與(yǔ)保守性。
鴨(yā)疫(yì)裏(lǐ)默(mò)氏杆(gān)菌PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的正(zhèng)確(què)結(jié)合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板的結(jié)合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的。聚合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與引物(wù)的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保守性高(gāo)的(dí)靶基因區，其(qí)特(tè)異性程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待測模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出一個靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位)；在細(xì)菌學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般(bān)用電(diàn)泳分析，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素，無放射性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要(yào)求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術概論(lùn)。
