產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
|
裂穀(gǔ)熱病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Rift Valley Fever Virus(RVFV)RTPCR |
YS-P014689 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期(qī)一般為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增部(bù)分的(dí)試劑一(yī)般要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分(fēn)試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定(dìng)在剛好超過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測結(jié)果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實驗中同時滿足，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯的(dí)指數(shù)擴增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本建議復核(hé)一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期(qī)，則判定為陽性，否則判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準確引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的特異性與保守(shǒu)性。
裂穀(gǔ)熱(rè)病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結合(hé)是關鍵。引物與模板的(dí)結合及(jí)引物(wù)鏈(liàn)的延伸是遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(hé)(復性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫(wēn)度下進行(háng)，結合(hé)的特異(yì)性(xìng)大(dà)大增(zēng)加，被擴增的靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守(shǒu)性高的靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可(kě)直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液，體腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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