產(chǎn)品中心
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
|
鴨沙門氏菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Salmonella anatumPCR |
YS-P014700 |
分類:PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲存條件(jiàn):-20℃避光保(bǎo)存,避免(miǎn)反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸(shū):低溫(wēn),避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年,這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的儲(chǔ)存溫度下。核酸擴增(zēng)部分的試劑一(yī)般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定:將閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點(diǎn)。
2. 陽性質(zhì)控品的檢測(cè)結果應為(wéi)陽性(xìng),有(yǒu)明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct值應小於(yú)等於35;
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實(shí)驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú),否則(zé)該次實驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可(kě)疑(yí):有明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣本(běn);對於可疑樣本建議復核(hé)一次,若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增期,則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性,否(fǒu)則判定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣本。
【對檢驗結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙染(rǎn),試劑(jì)汙(wū)染(rǎn),樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ);
2. 試劑(jì)運輸,保存不當或試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢測(cè)效能下降(jiàng),可能會導致出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實性;
④靶基因的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
鴨沙門(mén)氏(shì)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的正確結(jié)合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的結合及引物鏈的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶合成反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高溫性,使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與引物的(dí)結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng),結合的(dí)特(tè)異(yì)性大大增加(jiā),被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能保(bǎo)持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區(qū),其特異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的(dí),能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模板擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細胞(bāo);在病毒的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單(dān)位(wèi));在細菌學(xué)中zui小檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便,快速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一(yī)次性地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後,即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳(yǒng)分析,不(bù)一定要(yào)用同位素,無放射性(xìng)汙染,易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要(yào)分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液,體腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
