產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
商品屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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亞利桑那(nà)沙門(mén)氏菌PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé) |
Salmonella arizonaePCR |
YS-P014701 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保(bǎo)存，避免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光。
有效期：一(yī)年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這是指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點(diǎn)。
【質(zhì)控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性，有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在(zài)一(yī)次實驗(yàn)中同時(shí)滿足，否(fǒu)則該次實驗視為無效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙(wū)染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的試劑檢測效能(néng)下(xià)降，可能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保守性。
亞(yà)利(lì)桑那沙(shā)門(mén)氏(shì)菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引物與模板(bǎn)的(dí)結合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使反應中模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(hé)(復性)可(kě)以在較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行，結合的特異(yì)性大大(dà)增加，被(bèi)擴增的(dí)靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也(yě)就能(néng)保持很高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇(zé)特異性和(hé)保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特(tè)異性(xìng)程(chéng)度就更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生成量是以指數方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進行(háng)變性-退火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定要(yào)用(yòng)同位(wèi)素，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均可作為擴(kuò)增模(mó)板。可直(zhí)接用(yòng)臨床標本如血液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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