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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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雞白痢沙(shā)門氏菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Salmonella pullorumPCR |
YS-P014716 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適當(dāng)的(dí)儲存溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分的(dí)試(shì)劑一般(bān)要(yào)貯存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次(cì)實驗視為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建議(yì)復核一(yī)次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，則判定(dìng)為陽(yáng)性，否則判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判定為(wéi)陰性樣本。
【對檢驗結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙染，試劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸(shū)，保存不當(dāng)或試劑配製(zhì)不準確(què)引起的(dí)試劑檢測效能下(xià)降，可能會導致出現(xiàn)假陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保(bǎo)守性。
雞白痢(lì)沙門氏(shì)菌PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模板的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段也(yě)就能保持很高的(dí)正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生成量是(shì)以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細胞(bāo)；在病(bìng)毒的檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋上(shàng)進行變(biàn)性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增產物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒或細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本(běn)如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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