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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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白(bái)蛉(líng)熱西(xī)西裏病毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Sandfly Fever Sicilian Virus(SFSV)RTPCR |
YS-P014722 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指在適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控品的(dí)檢測(cè)結(jié)果應為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在一次實驗中同(tóng)時滿足，否(fǒu)則該次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣本；對於可疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判定為陽性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染會出現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降，可(kě)能會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因的特異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
白蛉(líng)熱西西裏(lǐ)病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其(qí)中引物與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼基配對(duì)原則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以在較(jiào)高的溫度下進(jìn)行(háng)，結(jié)合(hé)的(dí)特異性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和保守性(xìng)高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異性(xìng)程度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產物的生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板(bǎn)擴增到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出一個靶細胞；在(zài)病毒的檢測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位(wèi))；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次(cì)性地(dì)將反應(yīng)液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射性(xìng)汙染，易(yì)推廣。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需要分離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴(kuò)增模板。可直接用臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概(gài)論。
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