產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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聖(shèng)米吉爾海獅(shī)病(bìng)毒(dú)PCR檢測(cè)試劑盒 |
San Miguel sea lion virus (SMSV)RTPCR |
YS-P014721 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū):低溫,避光。
有效(xiào)期:一年
貨期:現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效期(qī)一般為(wéi)1年(nián),這是(shì)指在適當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反復(fù)凍融。
u 閾值(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰性質控品擴增曲綫的最高點。
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為陽(yáng)性,有明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上要求需(xū)在一(yī)次實(shí)驗中同時滿足,否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本;對(duì)於可疑樣本(běn)建議復(fù)核一(yī)次,若(ruò)復(fù)核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期,則(zé)判(pàn)定(dìng)為陽(yáng)性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰(yīn)性(xìng):無指數擴(kuò)增期,Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染,試劑(jì)汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染會(huì)出現假陽性(xìng)結果;
2. 試(shì)劑運輸,保存不當或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng),可能(néng)會(huì)導致出(chū)現(xiàn)假陰性結果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性;
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
聖米吉(jí)爾(ěr)海獅(shī)病毒PCR檢測(cè)試劑盒其中引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性,使反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復性)可以在較(jiào)高(gāo)的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行,結(jié)合的特(tè)異性大大增加,被擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基(jī)因區,其特(tè)異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的,能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞(bāo);在病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng),PCR的靈(líng)敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空斑形成(chéng)單位);在細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便,快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液加好後(hòu),即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋上進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng),一般(bān)在2~4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī),不一(yī)定要用同位素(sù),無放射(shè)性(xìng)汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求低
不需要分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養細(xì)胞,DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨(lín)床標(biāo)本(běn)如血液(yè),體(tǐ)腔液,洗嗽液,毛發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論。
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