產品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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寄生水黴(méi)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Saprolegnia parasiticaPCR |
YS-P014724 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲(chǔ)存溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分的試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過正常陰性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核(hé)一次(cì)，若復核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保存不當(dāng)或試(shì)劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導致出現(xiàn)假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
寄生水(shuǐ)黴PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的(dí)結(jié)合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫度(dù)下(xià)進(jìn)行，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇特異性和保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區，其特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的(dí)生(shēng)成量是(shì)以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性(xìng)地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要求低
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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